Già nel 2009 il CDC considerava i test PCR con Ct>30 spazzatura

Era l'epoca della falsa pandemia di H1N1 (quella di SARS-CoV-2 altro non è che una riedizione) e già il CDC statunitense scriveva dell'inaffidabilità dei test PCR con amplificazione superiore a 30 cicli. Eppure i regimi sanitocratici instauratisi nel mondo con la scusa dell'epidemia da Covid-19 conitnuano a tenere in catene miliardi di persone attraverso l'uso di questi test che superano a volte anche i 45 cicli sfornando falsi positivi.

Guida provvisoria alla raccolta, elaborazione e analisi dei campioni per i pazienti con sospetta infezione da virus della nuova influenza A (H1N1)

13 maggio 2009, 00:45 ET

Obiettivo: fornire una guida provvisoria sulla raccolta, conservazione, elaborazione e analisi dei campioni appropriati per i pazienti con sospetta infezione da virus dell'influenza A (H1N1).

Definizione del caso

Un caso confermato di nuova infezione da virus dell'influenza A (H1N1) è definito come una persona con una malattia simile all'influenza con infezione da virus dell'influenza A (H1N1) confermata in laboratorio da uno o più dei seguenti test:

1. RT-PCR in tempo reale
2. cultura virale

Durata della diffusione virale

La durata della diffusione con il nuovo virus dell'influenza A (H1N1) è sconosciuta. Pertanto, fino a quando i dati non saranno disponibili, la durata stimata della diffusione virale si basa sull'infezione da virus dell'influenza stagionale. Si presume che le persone infette stiano emettendo virus e potenzialmente infettive dal giorno prima dell'insorgenza della malattia fino alla risoluzione della febbre. Si deve presumere che le persone infette siano contagiose fino a 7 giorni dall'insorgenza della malattia. Alcune persone che sono infette potrebbero potenzialmente diffondere il virus ed essere contagiose per periodi più lunghi (ad es. Bambini piccoli, persone immunodepresse e immunocompromesse).  

Test per il nuovo virus dell'influenza A (H1N1)

I medici dovrebbero considerare di testare i casi sospetti di nuova influenza A (H1N1), in particolare quelli con malattia grave, ottenendo un campione delle vie respiratorie superiori per testare il nuovo virus dell'influenza A (H1N1).

Campioni respiratori preferiti

Quanto segue deve essere raccolto il prima possibile dopo l'esordio della malattia: tampone nasofaringeo, aspirato nasale o tampone nasofaringeo combinato con tampone orofaringeo. Se questi campioni non possono essere raccolti, è accettabile un tampone nasale o un tampone orofaringeo. Per i pazienti che sono intubati, deve essere raccolto anche un aspirato endotracheale. Sono accettabili anche campioni di lavaggio broncoalveolare (BAL) ed espettorato. I campioni devono essere posti in un terreno di trasporto virale sterile (VTM) e immediatamente collocati su ghiaccio o impacchi freddi oa 4 ° C (frigorifero) per il trasporto al laboratorio. Le linee guida consigliate per il controllo delle infezioni sono disponibili per le persone che raccolgono campioni clinici in cliniche e altri ambienti clinici e per il personale di laboratorio .

Tamponi

Idealmente, i campioni di tampone dovrebbero essere raccolti utilizzando tamponi con una punta sintetica (ad esempio poliestere o Dacron®) e uno stelo in alluminio o plastica. I tamponi con punte di cotone e aste di legno non sono raccomandati. I campioni raccolti con tamponi di alginato di calcio non sono accettabili. Le fiale di raccolta dei campioni di tampone devono contenere 1-3 ml di terreno di trasporto virale (ad es. Contenente, stabilizzante proteico, antibiotici per scoraggiare la crescita di batteri e funghi e soluzione tampone).

Conservazione dei campioni clinici

Tutti i campioni respiratori devono essere conservati a 4 ° C per non più di 4 giorni. 

Spedizione di campioni clinici

I campioni clinici devono essere spediti su ghiaccio umido o confezioni fredde in imballaggi appropriati. Tutti i campioni devono essere etichettati in modo chiaro e includere le informazioni richieste dal laboratorio di sanità pubblica dello Stato. I campioni di casi sospetti spediti dal laboratorio di sanità pubblica statale al CDC devono includere tutte le informazioni necessarie per l'isolato di sorveglianza dell'influenza stagionale o la presentazione dei campioni.  

Test consigliati

La RT-PCR in tempo reale è il test consigliato per la conferma di nuovi casi di influenza A (H1N) 1. Attualmente, il nuovo virus dell'influenza A (H1N1) sarà positivo per l'influenza A e negativo per H1 e H3 mediante RT-PCR in tempo reale. Se la reattività della RT-PCR in tempo reale per l'influenza A è forte (ad esempio Ct <30), è più suggestivo di un nuovo virus dell'influenza A (H1N1). La conferma come nuovo virus dell'influenza A (H1N1) mediante RT-PCR in tempo reale è stata originariamente eseguita solo presso il CDC, ma in questo momento potrebbe essere disponibile nel laboratorio di sanità pubblica dello stato.

Altri test influenzali

Test rapido dell'antigene influenzale

Alcuni test rapidi disponibili in commercio possono distinguere tra i virus dell'influenza A e B. Un paziente con un test rapido positivo per l'influenza A può soddisfare i criteri per un caso sospetto di nuova infezione da virus dell'influenza A (H1N1). Tuttavia, non è possibile differenziare dai virus dell'influenza stagionale A. Inoltre, questi test hanno sensibilità e specificità sconosciute per rilevare l'infezione umana con il nuovo virus dell'influenza A (H1N1) in campioni clinici e hanno una sensibilità non ottimale per rilevare i virus dell'influenza stagionale. Pertanto, un test rapido negativo potrebbe essere un falso negativo e non dovrebbe essere considerato un test diagnostico finale per la nuova infezione da virus dell'influenza A (H1N1). 

Immunofluorescenza (DFA o IFA)

Questi test possono distinguere tra i virus dell'influenza A e B. Un paziente con un positivo per l'influenza A mediante immunofluorescenza può soddisfare i criteri per un caso sospetto. Tuttavia, non è possibile differenziare dai virus dell'influenza stagionale A. L'immunofluorescenza dipende dalla qualità di un campione clinico, dalle capacità dell'operatore e ha una sensibilità e specificità sconosciute per rilevare l'infezione umana con il nuovo virus dell'influenza A (H1N1) nei campioni clinici. Pertanto, un'immunofluorescenza negativa potrebbe essere un falso negativo e non dovrebbe essere considerato un test diagnostico finale per la nuova infezione da virus dell'influenza A (H1N1). 

Cultura virale

L'isolamento del nuovo virus dell'influenza A (H1N1) è diagnostico di infezione, ma potrebbe non produrre risultati tempestivi per la gestione clinica. Una coltura virale negativa non esclude l'infezione con il nuovo virus dell'influenza A (H1N1).

Fonte

https://www.cdc.gov/h1n1flu/specimencollection.htm